內(nèi)源性干擾因素，包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。

一、類風(fēng)濕因子在類風(fēng)濕患者及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的類風(fēng)濕因子(RF)，其一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)合的特點(diǎn)，因為在ELISA測定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標(biāo)的特異抗體IgG結(jié)合，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

避免其發(fā)生的方法有：

1.  用F(ab)2替代完整的IgG。

2.  標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。

3.  檢測抗原時，可用2-巰基yi醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。 

二、補(bǔ)體在固相酶免疫測定中，來自哺乳動物的固相抗體和酶標(biāo)二抗均有激活人補(bǔ)體系統(tǒng)的功能。一方面，固相抗體和酶標(biāo)二抗可因其吸附及結(jié)合過程中抗體分子發(fā)生變構(gòu)，使Fc段的補(bǔ)體C1q結(jié)合點(diǎn)暴露出來，使C1q成為一個中介物將二者交聯(lián)起來出現(xiàn)假陽性結(jié)果。另一方面，固相抗體也會因為活化補(bǔ)體的結(jié)合，封閉抗體和抗原的表位結(jié)合能力而引起假陰性。

解決的辦法是：

1.  用EDTA稀釋標(biāo)本。

2.  56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活。